Metilazione del DNA nel tessuto prostatico tumorale e non tumorale come marker di sviluppo e progressione del tumore della prostata

DNA methylation in prostate neoplastic and non-neoplastic tissue as a marker of prostate cancer development and progression

OBIETTIVI GENERALI E SINTESI PROGETTO

Lo studio ha lo scopo di identificare marcatori di diagnosi e prognosi per il tumore della prostata, in particolare per differenziare al momento della diagnosi i tumori aggressivi da quelli indolenti e capire, in caso di biopsia negativa, la probabilità di diagnosi di tumore della prostata a una successiva biopsia.

I marcatori di metilazione riguardano geni candidati (GSTP1, RUNX3, APC, PTX2, altri candidati) e la metilazione globale misurata tramite LINE-1.

MATERIALI, METODI E RISULTATI ATTESI

Il progetto si articola in diversi studi.

  • Il primo studio coinvolge due coorti, ciascuna di 250 pazienti diagnosticati presso l’Anatomia patologica dell’Ospedale Molinette di Torino e seguiti nel tempo per mortalità causa-specifica. Sui campioni di tessuto in paraffina dei pazienti selezionati sono eseguite analisi in PCR per la valutazione del grado di ipermetilazione dei geni tumore-associati. Limitatamente ai pazienti che hanno avuto una prostatectomia o una resezione transuretrale della prostata (TURP) si studia anche il pattern di metilazione e l'ipometilazione globale sul tessuto prostatico non-tumorale sia per valutarne la correlazione con il tessuto tumorale sia in associazione con la sopravvivenza.
  • Il secondo studio comprende pazienti dell’Anatomia patologica dell'Ospedale Molinette che abbiano ricevuto due prelievi di tessuto prostatico a una distanza di almeno 3 mesi di tempo tra il 1992 e i primi anni del 2000. Sono arruolati nello studio 150 soggetti con un prelievo negativo seguito da uno positivo per tumore (casi dello studio) e 150 pazienti di controllo con due prelievi negativi appaiati. Per entrambi i prelievi per i casi e i controlli si estrae il DNA dal blocchetto di tessuto fissato in paraffina. Lo stato di metilazione è valutato con la tecnica del pirosequenziamento dopo modificazione con bisolfito. 
  • E' in corso poi un altro studio collaborativo di ampie dimensioni innestato nei registri clinici svedesi, per replicare i principali risultati emersi nei primi due studi. Questo studio (ProMort) prevede la raccolta di un campione di tessuto e informazioni cliniche per 700 pazienti con tumore della prostata a rischio basso o intermedio che siano deceduti a causa del tumore e 700 controlli che, invece, siano ancora vivi o morti per altre cause.
  • Dal 2016, inoltre, è in corso un ulteriore studio per capire se la metilazione del DNA nel tessuto prostatico normale e tumorale muti nel tempo e se tale cambiamento possa essere utilizzato come marcatore di diagnosi e prognosi. Lo studio è basato su una serie di coorti di pazienti con biopsie ripetute della prostata e coinvolge in totale circa 600 pazienti.

STATO DI AVANZAMENTO AL 31/12/2017

Il reclutamento dei pazienti e le analisi molecolari procedono per gli studi in corso. Per gli altri studi sono in fase di svolgimento analisi statistiche e la preparazione dei report scientifici.

RISORSE E FINANZIAMENTI

Associazione Italiana per la Ricerca sul Cancro (AIRC).

COLLABORATORI

Valentina Fiano, Anna Gillio-Tos, Chiara Grasso, Franco Merletti, Laura De Marco, Daniela Zugna, Renata Zelic, Olof Akre, Andreas Pettersson.

PUBBLICAZIONI

- Fiano V, Zugna D, Grasso C, et al. LINE-1 methylation status in prostate cancer and non-neoplastic tissue adjacent to tumor in association with mortality Epigenetics 2017; 12: 11-18.
- Zelic R, Fiano V, Zugna D, et al. Global Hypomethylation (LINE-1) and Gene-Specific Hypermethylation (GSTP1) on Initial Negative Prostate Biopsy as Markers of Prostate Cancer on a Rebiopsy. Clin Cancer Res 2016; 15 ;22: 984-92.
- Grasso C, Trevisan M, Fiano V, et al. Performance of Different Analytical Software Packages in Quantification of DNA Methylation by Pyrosequencing. PLoS One 2016; 11: e0150483.
- Zelic R, Fiano V, Grasso C, et al. Global DNA hypomethylation in prostate cancer development and progression: a systematic review. Prostate Cancer Prostatic Dis 2015;18:1-12.
- Richiardi L, Fiano V, Grasso C, et al. Methylation of APC and GSTP1 in non-neoplastic tissue adjacent to prostate tumour and mortality from prostate cancer. PLoS One 2013; 8: e68162.